J Virol| 輪狀病毒新型三價重組基因工程疫苗研制取得新進展

輪狀病毒（rotavirus，RoV）是引起嬰幼兒及仔豬、犢牛等幼齡動物發(fā)生嚴重腹瀉的人畜共患病原，危害人類健康和畜牧業(yè)發(fā)展，造成巨大經濟損失。導致仔豬水樣腹瀉的豬輪狀病毒（PoRV）目前在臨床上呈現陽性檢測率居高不下、基因型愈發(fā)復雜的流行態(tài)勢，流行病學調查結果顯示G9型PoRV已成為臨床優(yōu)勢流行毒株，其次是G5和G4型毒株。疫苗是防控PoRV最有效的手段，但是目前商品化疫苗只包含了G5型毒株，面對臨床上流行的不同亞型的病毒，現有疫苗交叉保護效果不理想，亟需開發(fā)新型多價廣譜疫苗。

近日，江蘇省農業(yè)科學院獸醫(yī)所李彬研究員團隊通過PoRV反向遺傳操作系統(tǒng)在三價重組基因工程疫苗研制方向取得新進展，研究成果以題為“Simultaneous expression of three G genotypes of VP7 proteins in a recombinant porcine rotavirus confers protective immunity against multiple rotavirus infections”在線發(fā)表于國際病毒學權威期刊《Journal of Virology》。

研究人員首先構建了G9P [7]基因型NJ2012株PoRV的反向遺傳操作系統(tǒng)，并利用了NSP1和NSP3開放閱讀框內可穩(wěn)定表達異源基因的特點，將G5基因型VP7基因插入NSP1基因片段，將G4基因型VP7基因插入NSP3基因片段，成功構建G5/9二價重組病毒rNJ2012-NSP1-fG5-VP7、G4/9二價重組病毒rNJ2012-NSP3-haG4-VP7和G4/5/9三價重組病毒rNJ2012-fG5-VP7/haG4-VP7。為了評估這些多價重組病毒的免疫原性，研究人員用重組病毒和野生型病毒制備成疫苗免疫4周齡小鼠。結果發(fā)現，主動免疫后實驗組均能產生高水平的免疫應答，其中三價重組病毒疫苗免疫組綜合效果最優(yōu)。

為進一步評估該新型疫苗對動物的被動保護效果，研究人員進行了妊娠母鼠的免疫實驗，攻毒實驗結果顯示，三價重組疫苗免疫組所產5日齡乳鼠的腹瀉率、排毒量及腸道病理損傷均顯著降低，且針對臨床上廣泛流行的G4、G5和G9 3種基因型的特異性IgG抗體與中和抗體水平均顯著高于其他組，證實母源抗體可有效傳遞至乳鼠并發(fā)揮保護作用。

綜上所述，本研究首次建立了G9P[7]基因型PoRV的反向遺傳操作系統(tǒng)，并利用該平臺研制了針對當前PoRV流行基因型的新型三價重組基因工程疫苗，其具有較好的免疫保護效果，可作為預防控制PoRV的候選疫苗，對我國豬輪狀病毒的防控具有重要意義。

南京農業(yè)大學和江蘇省農科院聯合培養(yǎng)博士生程曦為論文第一作者，江蘇省農科院獸醫(yī)所李彬研究員、陶然博士和南京農業(yè)大學動物醫(yī)學院楊曉靜教授為論文共同通訊作者。該研究得到了國家自然科學基金、江蘇省自主創(chuàng)新基金及江蘇省卓越博士后計劃等項目資助。

本期編輯：小黃