新一代重組病毒構建篩選技術開發猴痘新型疫苗

近日，中國生物新突發傳染病新型疫苗研發全國重點實驗室病毒載體和重組病毒技術研究團隊在國際著名病毒學期刊《Journal of Virology》和《Journal of Virological Methods》發表了創新高效和精準重組病毒疫苗構建和篩選方法等系列研究成果，豐富了新突發傳染病疫苗研發技術路徑，開發了新一代猴痘減毒活疫苗。

研究團隊創新運用CRISPR-Cas基因編輯技術，對我國傳統“功勛毒株”痘苗病毒天壇株（Vaccinia Virus Tiantan，VTT）進行精準改造。研究結果表明，引入CRISPR-Cas基因編輯技術對病毒基因組多點位、定向精準編輯，規避了既往同源重組技術整合效率低、毒株獲取慢的技術缺點。

應用CRISPR-Cas基因編輯技術，研究團隊敲除了VTT基因組中與毒力、宿主范圍及免疫調節相關的多個基因片段（包括C12L-K2L及A45R等）。研究結果證明，構建的新型減毒株rVTTΔC12K2ΔA45能誘導出針對猴痘病毒（MPXV）在動物攻毒保護實驗中表現出顯著保護效力，為開發新一代猴痘病毒疫苗提供技術支撐。

研究團隊建立基于實時動態監測病毒單克隆篩選方法，結合實時活細胞成像分析技術，高通量實時監控細胞病變效應形成過程的明場與熒光雙通道信號，精準識別并分離出無母本污染、表型均一的純重組克隆，加速篩選進程。從多個候選克隆中篩選出遺傳穩定、均一性好的候選疫苗株。

新突發傳染病新型疫苗研發全國重點實驗室長期致力于新突發傳染病疫苗研發技術創新。該系列研究成果已經應用于DNA病毒類載體和重組病毒構建，是重組病毒載體技術平臺的標志性成果之一，除此之外，團隊還搭建基于反向遺傳學技術的RNA病毒類載體和重組病毒構建，構建成功麻疹病毒、水泡口炎病毒等病毒載體，未來將服務于新突發傳染病疫苗研發，為我國生物安全保障提供技術支撐。

來源：新突發傳染病新型疫苗研發全國重點實驗室

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