《食品科學(xué)》：集美大學(xué)劉慶梅副教授等：魚腥草多糖的發(fā)酵法制備與抗過(guò)敏活性

魚腥草（Houttuynia cordata Thunb.）又名折耳根、狗心草、蕺菜等，最早記載于《名醫(yī)別錄》，具有清熱解毒、消癰排膿之功效。作為我國(guó)傳統(tǒng)食物之一，魚腥草早已被《中國(guó)藥典》收錄，并納入“食藥同源”物質(zhì)目錄當(dāng)中，其含有多糖、揮發(fā)油、黃酮類化合物和有機(jī)酸等活性物質(zhì)。有研究表明，魚腥草多糖是魚腥草的重要活性成分之一，現(xiàn)代藥理學(xué)證明其具有抗炎、抗菌、免疫調(diào)節(jié)和腸道菌群調(diào)節(jié)等作用。

近年來(lái)，利用微生物發(fā)酵改變植物性食品中多糖結(jié)構(gòu)以提高其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值并拓寬多糖應(yīng)用領(lǐng)域，已成為熱門方法并受到學(xué)者重視。微生物發(fā)酵是指利用微生物酶分解發(fā)酵底物從而產(chǎn)生和富集生物活性化合物的方法，能夠有效提高食物的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。通過(guò)微生物發(fā)酵法對(duì)魚腥草多糖進(jìn)行改性提高其生物活性是一種安全、綠色、可靠的方法。

研究表明，魚腥草水提物能夠下調(diào)KU812細(xì)胞免疫球蛋白E（IgE）Fc段受體（FcεR）I表達(dá)以及抑制IgE介導(dǎo)的大鼠嗜堿性白血病細(xì)胞（RBL）-2H3活化，從而緩解過(guò)敏性疾病。然而，魚腥草對(duì)肥大細(xì)胞活化的抑制機(jī)制仍未得到解析，其抗過(guò)敏活性尚未揭示，難以支撐抗過(guò)敏產(chǎn)品的開發(fā)。

集美大學(xué)海洋食品與生物工程學(xué)院的林泳峰、程珍、劉慶梅*等人利用植物乳植桿菌HM6008發(fā)酵對(duì)水提物中的魚腥草多糖進(jìn)行改性，并分析其抗過(guò)敏活性差異，以期提高魚腥草多糖緩解過(guò)敏反應(yīng)的能力。

1 植物乳植桿菌發(fā)酵對(duì)魚腥草多糖化學(xué)組成與分子質(zhì)量的影響

如表1所示，2 種多糖的主要成分均為阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖和半乳糖醛酸，并且含有少量的巖藻糖、木糖、甘露糖以及葡萄糖醛酸，這一結(jié)果與魚腥草多糖的單糖組成相似，說(shuō)明植物乳植桿菌HM6008發(fā)酵對(duì)單糖的組成類型并未產(chǎn)生影響。發(fā)酵前后多糖的總糖與還原糖含量未發(fā)生明顯變化。FHCTP中鼠李糖、木糖、甘露糖和葡萄糖醛酸相對(duì)含量分別比原來(lái)增加了20.30%、24.19%、47.80%、21.74%，而半乳糖醛酸則減少了17.12%。此外，植物乳植桿菌H6008發(fā)酵使得魚腥草多糖的硫酸根相對(duì)含量由原來(lái)的0.78%增加到2.16%，分子質(zhì)量由153.61 kDa增加到201.65 kDa。

乳酸菌在發(fā)酵過(guò)程中可分泌多種水解酶改變多糖的化學(xué)組成，且在不同的乳酸菌中，植物乳植桿菌可有效提高甘露糖占比。有研究報(bào)道，植物乳植桿菌對(duì)波羅蜜多糖和馬尾藻多糖進(jìn)行發(fā)酵后，二者的單糖組成比例均發(fā)生改變但單糖種類不受發(fā)酵影響，本研究利用植物乳植桿菌發(fā)酵魚腥草也得到了同樣結(jié)果。此外，由于植物乳植桿菌為發(fā)酵菌種，故FHCTP的甘露糖含量明顯增加。Yu Yangyang與Wang Qian等研究發(fā)現(xiàn)，在發(fā)酵過(guò)程中乳酸菌分泌的水解酶能夠?qū)Χ嗵堑奶侨┧徇M(jìn)行降解與利用，波羅蜜多糖與五味子果實(shí)多糖在植物乳植桿菌的作用下糖醛酸總量下降。同樣，本研究中魚腥草多糖在植物乳植桿菌的作用后糖醛酸總量有所下降。多糖分子質(zhì)量在發(fā)酵后通常能夠進(jìn)一步降低，而在本研究中植物乳植桿菌HM6008發(fā)酵后，F(xiàn)HCTP的分子質(zhì)量卻高于HCTP，這可能是由于在發(fā)酵過(guò)程中，低分子質(zhì)量的多糖被乳酸菌分泌的酶水解用于微生物的生長(zhǎng)，而基質(zhì)中的淀粉和纖維素等大分子物質(zhì)被破環(huán)，促進(jìn)功能性成分的釋放從而增加高分子質(zhì)量多糖的可提取性。結(jié)果表明，植物乳植桿菌HM6008發(fā)酵改變了魚腥草多糖的化學(xué)組成與分子質(zhì)量，尤其提高了FHCTP中的甘露糖和硫酸根含量。

2 植物乳植桿菌對(duì)魚腥草多糖粒徑和穩(wěn)定性的影響

益生菌發(fā)酵改變了多糖的化學(xué)組成與分子質(zhì)量，將進(jìn)一步影響多糖的理化性質(zhì)，若多糖溶液的顆粒粒徑越小則越容易被人體吸收與利用。如圖1A所示，在0.25～1 mg/mL范圍內(nèi)，HCTP和FHCTP粒徑隨著質(zhì)量濃度的增加無(wú)明顯變化。在質(zhì)量濃度為1 mg/mL條件下，HCTP的粒徑約為150 nm，而經(jīng)過(guò)植物乳植桿菌HM6008發(fā)酵后，F(xiàn)HCTP粒徑極其顯著變小，約減小至110 nm，減小了26.67%。有研究表明，植物乳植桿菌發(fā)酵促使波羅蜜多糖、百合多糖的粒徑呈現(xiàn)下降趨勢(shì)；Huang Fei等同樣發(fā)現(xiàn)發(fā)酵顯著降低了龍眼多糖的粒徑。因此，植物乳植桿菌HM6008發(fā)酵能夠有效降低HCTP粒徑，這有利于提高FHCTP的生物利用度。

Zeta電位的絕對(duì)值越高表示溶液顆粒間的電位差越大，即顆粒間的排斥力越強(qiáng)，溶液越穩(wěn)定。如圖1B所示，在0.25～1 mg/mL范圍內(nèi)，魚腥草多糖的Zeta電位絕對(duì)值處于21～32 mV之間，表明兩種多糖具有良好的溶液穩(wěn)定性。此外，HCTP與FHCTP的Zeta電位絕對(duì)值隨著質(zhì)量濃度的下降而升高，說(shuō)明魚腥草多糖質(zhì)量濃度越低，溶液的穩(wěn)定性越好。其原因可能是當(dāng)濃度下降時(shí)，顆粒之間距離增加導(dǎo)致相互引力減小，從而降低了顆粒之間聚集程度，增加顆粒的總比表面積，導(dǎo)致表面電荷增多，從而提高Zeta電位。與HCTP相比，相同質(zhì)量濃度條件下的FHCTP Zeta電位絕對(duì)值顯著上升，溶液穩(wěn)定性得到提高，這可能是發(fā)酵導(dǎo)致分子質(zhì)量增加和單糖組成改變所引起。結(jié)果表明，發(fā)酵提高了多糖溶液的穩(wěn)定性。

3 植物乳植桿菌發(fā)酵對(duì)魚腥草多糖表觀黏度與結(jié)構(gòu)的影響

多糖的單糖組成、鏈長(zhǎng)、支鏈結(jié)構(gòu)和聚合度等結(jié)構(gòu)特征的改變能夠影響多糖的黏度特性。如圖2A所示，在5 mg/mL質(zhì)量濃度條件下，HCTP與FHCTP的黏度均隨剪切速率的增加而升高，這可能是HCTP與FHCTP具有較長(zhǎng)的主鏈與豐富的分支所致，當(dāng)剪切速率開始增加時(shí)，多糖主鏈的纏繞導(dǎo)致黏度上升，隨著剪切速率的進(jìn)一步增加，溶液中顆粒間的碰撞幾率增加，促進(jìn)顆粒之間聚合，支鏈進(jìn)一步纏繞增加溶液的黏度。植物乳植桿菌HM6008發(fā)酵后，F(xiàn)HCTP的表觀黏度極顯著低于HCTP，這可能是因?yàn)橹参锶橹矖U菌所分泌的水解酶誘導(dǎo)多糖分子鏈發(fā)生分解，減少了多糖鏈之間的纏繞，增加了液體的流動(dòng)性。此外，發(fā)酵降低FHCTP的粒徑并增加了溶液穩(wěn)定性，這有助于降低顆粒間的聚合，能夠進(jìn)一步減少多糖鏈的纏繞，從而降低多糖的黏度。由此可知，發(fā)酵增加FHCTP溶液的流動(dòng)性，有助于提高其與細(xì)胞的結(jié)合效率。

多糖的單糖組成、化學(xué)鍵、官能團(tuán)、空間構(gòu)象，交聯(lián)度等都會(huì)受到發(fā)酵的影響，從而引起多糖形態(tài)的變化。利用掃描電鏡觀察HCTP與FHCTP的微觀結(jié)構(gòu)，結(jié)果如圖2B所示。HCTP與FHCTP均具有較大的片狀結(jié)構(gòu)。植物乳植桿菌HM6008發(fā)酵前，魚腥草多糖表面光滑，片狀結(jié)構(gòu)較為致密，由于發(fā)酵后單糖組成比例發(fā)生變化以及多糖分子鏈的分解與粒徑下降可能改變了多糖的空間構(gòu)象，因此FHCTP表面變得粗糙且具有較小的破損結(jié)構(gòu)。

植物乳植桿菌發(fā)酵對(duì)多糖主要官能團(tuán)與化學(xué)鍵的影響如圖2C所示。HCTP與FHCTP的紅外光譜在3 400 cm-1左右檢測(cè)到強(qiáng)烈的寬峰為O—H的拉伸振動(dòng)，2 923 cm-1處為C—H的伸縮振動(dòng)，此為多糖類的特征吸收峰。在1 641 cm-1附近具有較高的吸收峰與C＝O不對(duì)稱拉伸振動(dòng)相關(guān)，表明多糖含有大量的糖醛酸。位于1 408 cm-1的吸收峰則為COO-的對(duì)稱拉伸。1 238 cm-1處的吸收峰證明微量糖醛酸和硫酸酯的存在。1 000～1 200 cm-1之間則以環(huán)的振動(dòng)為主，并且與C—O—C糖苷鍵及C—O—H側(cè)基的振動(dòng)重疊，證明葡糖糖基與吡喃環(huán)半乳糖的存在。HCTP與FHCTP的紫外光譜掃描結(jié)果如圖2D所示。在260～280 nm波長(zhǎng)范圍有微弱的寬峰出現(xiàn)，說(shuō)明多糖中含有少量的蛋白和核酸。這與Zhang Jun等的研究結(jié)果相同，發(fā)酵沒有破壞多糖的官能團(tuán)以及結(jié)構(gòu)，并且HCTP與FHCTP可能是多糖和蛋白與核酸的偶聯(lián)物。

4 FHCTP對(duì)肥大細(xì)胞的影響

當(dāng)機(jī)體暴露在過(guò)敏原下，過(guò)敏原與IgE-FcεRI復(fù)合物交聯(lián)并激活效應(yīng)細(xì)胞發(fā)生脫顆粒，會(huì)引起機(jī)體發(fā)生過(guò)敏反應(yīng)，因此本實(shí)驗(yàn)分析了FHCTP對(duì)IgE介導(dǎo)的肥大細(xì)胞活化的影響。用CCK-8試劑檢測(cè)多糖的細(xì)胞毒性，在0.25～1 mg/mL的工作質(zhì)量濃度中，HCTP與FHCTP干預(yù)下的細(xì)胞活力分別達(dá)到（99.71±0.27）%與（98.29±0.57）%，說(shuō)明二者均無(wú)細(xì)胞毒性。脫顆粒實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，F(xiàn)HCTP的脫顆粒抑制率達(dá)到（82.79±5.19）%，顯著高于HCTP（（53.75±1.95）%）。結(jié)果表明HCTP與FHCTP均能顯著抑制RBL-2H3細(xì)胞脫顆粒，且FHCTP表現(xiàn)出更佳的抑制活性。

有研究表明，肥大細(xì)胞表面的FcεRI通過(guò)與IgE結(jié)合以防止內(nèi)化增加表達(dá)量，這在肥大細(xì)胞激活方面具有重要作用，當(dāng)FcεRI的表達(dá)受到抑制時(shí)，效應(yīng)細(xì)胞表面的IgE-FcεRI復(fù)合物減少，進(jìn)而抑制效應(yīng)細(xì)胞的活化。因此，本研究利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)多糖處理對(duì)RBL-2H3細(xì)胞表面FcεRIα表達(dá)水平的影響，結(jié)果如圖3所示。在各質(zhì)量濃度條件下，HCTP與FHCTP均能顯著抑制RBL-2H3細(xì)胞表面FcεRI的表達(dá)，在1 mg/mL質(zhì)量濃度條件下，兩種多糖的抑制效果相當(dāng)，而當(dāng)多糖質(zhì)量濃度降至0.5 mg/mL時(shí)，F(xiàn)HCTP的抑制效果均顯著優(yōu)于HCTP，平均熒光強(qiáng)度由2 458.00±7.50降至1 495.00±28.50，并且0.25 mg/mL FHCTP的抑制作用與0.5 mg/mL HCTP的抑制效果相當(dāng)。結(jié)果表明，F(xiàn)HCTP對(duì)RBL-2H3細(xì)胞FcεRI表達(dá)的抑制效果優(yōu)于HCTP。

本實(shí)驗(yàn)證明了HCTP與FHCTP均能有效抑制肥大細(xì)胞脫顆粒，其可能是通過(guò)抑制肥大細(xì)胞表面FcεRI的表達(dá)，減少IgE和過(guò)敏原的附著，進(jìn)而達(dá)到抑制肥大細(xì)胞活化的效果。此外，糖醛酸含量與多糖的生物活性密切相關(guān)。有研究表明，糖醛酸含量與抗過(guò)敏活性呈正相關(guān)，尤其是葡萄糖醛酸。本研究中兩種多糖可能因糖醛酸總含量達(dá)到20%，故具有抗過(guò)敏活性。植物乳植桿菌HM6008發(fā)酵后，F(xiàn)HCTP對(duì)肥大細(xì)胞脫顆粒以及FcεRI表達(dá)具有更好的抑制效果，其原因可能是發(fā)酵使FHCTP粒徑更小、黏度更低，提高了生物可及性；雖然發(fā)酵提高了魚腥草多糖的分子質(zhì)量，可能不利于細(xì)胞的攝取利用，然而高分子質(zhì)量的多糖往往含有更多的活性基團(tuán)，有利于活性空間結(jié)構(gòu)的形成，使多糖具有更好的生物活性。此外，發(fā)酵提高了魚腥草多糖中甘露糖與硫酸根的含量，甘露糖的增加有利于細(xì)胞對(duì)多糖的識(shí)別，且有研究表明硫酸化的多糖具有抗過(guò)敏作用。因此，F(xiàn)HCTP表現(xiàn)出比HCTP更優(yōu)越的抑制肥大細(xì)胞激活作用。

5 FHCTP對(duì)肥大細(xì)胞形態(tài)的影響

肥大細(xì)胞脫顆粒往往伴隨著細(xì)胞膜的骨架蛋白異構(gòu)，F(xiàn)ITC標(biāo)記鬼筆環(huán)肽會(huì)與蛋白微絲結(jié)合，特異性染色細(xì)胞骨架F-actin蛋白。如圖4所示，陰性組為未經(jīng)激活的RBL-2H3細(xì)胞，在光學(xué)顯微鏡下細(xì)胞呈梭狀，邊緣清晰可見，長(zhǎng)有細(xì)長(zhǎng)的觸角，整體透明，經(jīng)過(guò)FITC標(biāo)記鬼筆環(huán)肽染色后，可清晰看出F-actin蛋白輪廓。當(dāng)陽(yáng)性組細(xì)胞經(jīng)DNP-BSA激活后，細(xì)胞形態(tài)出現(xiàn)明顯的潰散現(xiàn)象，觸角消失，且細(xì)胞邊緣模糊不清。而經(jīng)過(guò)質(zhì)量濃度為0.5 mg/mL的HCTP與FHCTP處理后，細(xì)胞形態(tài)明顯，邊緣較清晰，說(shuō)明RBL-2H3細(xì)胞激活得到有效抑制。與HCTP組相比，F(xiàn)HCTP組的細(xì)胞形態(tài)更為完整，更接近陰性組細(xì)胞的形態(tài)。

結(jié)果表明，HCTP與FHCTP均能有效抑制肥大細(xì)胞形態(tài)的變化，且FHCTP對(duì)F-actin蛋白的異構(gòu)抑制效果更佳，這與肥大細(xì)胞脫顆粒抑制效果相似。有研究表明，活性物質(zhì)可以通過(guò)抑制細(xì)胞骨架蛋白異構(gòu)，維持細(xì)胞膜的正常形態(tài)，從而穩(wěn)定肥大細(xì)胞，其作用效果與FHCTP相同。此外，發(fā)酵法制備的刺麒麟菜多糖與本研究中的FHCTP均能夠抑制肥大細(xì)胞的形態(tài)變化，而發(fā)酵植物乳植桿菌HM6008能夠提高多糖的生物可及性與利用率，這可能是HCTP與FHCTP抑制肥大細(xì)胞形態(tài)變化效果產(chǎn)生差異的原因。

6 FHCTP對(duì)肥大細(xì)胞Ca2+水平的影響

當(dāng)細(xì)胞骨架發(fā)生重組時(shí)將能夠促進(jìn)細(xì)胞鈣離子通道的開放，肥大細(xì)胞內(nèi)Ca2+水平的上升是脫顆粒和胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的重要影響因素，因此本研究采用RBL-2H3模型探究HCTP與FHCTP對(duì)細(xì)胞內(nèi)Ca2+水平的影響。A23187是一種Ca2+載體，能夠增加細(xì)胞內(nèi)的Ca2+水平，因此首先檢測(cè)了HCTP與FHCTP對(duì)A23187介導(dǎo)的肥大細(xì)胞脫顆粒的抑制效果。如圖5A所示，在0.25～1 mg/mL質(zhì)量濃度條件下，2 種多糖均能抑制A23187介導(dǎo)的肥大細(xì)胞脫顆粒，F(xiàn)HCTP對(duì)A23187介導(dǎo)的肥大細(xì)胞脫顆粒抑制效果在各質(zhì)量濃度下均顯著優(yōu)于HCTP。進(jìn)一步利用Flou-3-AM熒光探針標(biāo)記RBL-2H3細(xì)胞，F(xiàn)lou-3-AM熒光較弱，當(dāng)其進(jìn)入細(xì)胞后可被內(nèi)酯酶裂解形成Flou-3，F(xiàn)lou-3可與胞內(nèi)Ca2+結(jié)合然后發(fā)出強(qiáng)烈熒光。如圖5B所示，陽(yáng)性組的細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度顯著高于陰性組，而在分別經(jīng)過(guò)HCTP與FHCTP干預(yù)后，兩種多糖在1 mg/mL條件下均抑制了細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度上升，且接近于陰性組。如圖5C所示，陰性組綠色熒光強(qiáng)度較低，說(shuō)明正常細(xì)胞Ca2+內(nèi)流較少，而A23187激活之后，細(xì)胞熒光強(qiáng)度明顯增強(qiáng)，說(shuō)明細(xì)胞內(nèi)的Ca2+濃度顯著增加。在質(zhì)量濃度為0.25～1 mg/mL多糖處理后，細(xì)胞熒光強(qiáng)度均有不同程度的減弱，尤其是1 mg/mL的多糖干預(yù)下，細(xì)胞熒光強(qiáng)度接近陰性組，說(shuō)明HCTP與FHCTP均能有效抑制Ca2+內(nèi)流。

有研究表明，Ca2+內(nèi)流可進(jìn)一步促進(jìn)RBL-2H3細(xì)胞脫顆粒，而甘草酸可通過(guò)降低細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度抑制肥大細(xì)胞脫顆粒的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，并下調(diào)鈣通道蛋白的表達(dá)穩(wěn)定肥大細(xì)胞，這與HCTP和FHCTP通過(guò)抑制細(xì)胞骨架異構(gòu)和胞內(nèi)鈣離子濃度上升以穩(wěn)定肥大細(xì)胞的作用機(jī)制相似，同樣也說(shuō)明了調(diào)控鈣離子通道可能是不同來(lái)源抗過(guò)敏活性物質(zhì)的共同作用途徑。因此，本研究證明HCTP與FHCTP均能通過(guò)抑制F-actin蛋白的異構(gòu)，穩(wěn)定Ca2+通道，抑制Ca2+內(nèi)流，從而穩(wěn)定肥大細(xì)胞形態(tài)，抑制脫顆粒的發(fā)生，達(dá)到抑制肥大細(xì)胞活化的效果。

7 FHCTP對(duì)小鼠被動(dòng)皮膚過(guò)敏反應(yīng)的影響

為進(jìn)一步驗(yàn)證HCTP與FHCTP對(duì)肥大細(xì)胞的抑制作用，本研究構(gòu)建了肥大細(xì)胞介導(dǎo)的小鼠被動(dòng)皮膚過(guò)敏反應(yīng)模型，以探究HCTP與FHCTP在機(jī)體內(nèi)的作用效果。如圖6A所示，陽(yáng)性組小鼠耳朵藍(lán)斑明顯，說(shuō)明小鼠耳朵肥大細(xì)胞活化釋放顆粒物質(zhì)，引起血管擴(kuò)張、通透性增加促進(jìn)伊文思藍(lán)染料外滲，而陰性組小鼠耳朵肥大細(xì)胞未被激活，因此無(wú)明顯藍(lán)斑，且HCTP組與FHCTP組小鼠分別經(jīng)100、200、400 mg/kg的HCTP與FHCTP灌胃干預(yù)后，其耳朵藍(lán)斑與陽(yáng)性組小鼠相比均有所改善。如圖6B所示，在400 mg/kg治療劑量下HCTP與FHCTP的治療效果相當(dāng)；在200 mg/kg治療劑量下，HCTP組與FHCTP組小鼠耳朵的伊文思藍(lán)水平分別為0.40±0.05與0.22±0.01，在100 mg/kg的治療劑量下，兩組的伊文思藍(lán)水平分別為0.44±0.06與0.23±0.06，F(xiàn)HCTP組的伊文思藍(lán)水平均顯著低于HCTP組，說(shuō)明FHCTP治療對(duì)小鼠耳朵染料外滲的抑制效果優(yōu)于HCTP。結(jié)果表明，F(xiàn)HCTP在體內(nèi)同樣能夠發(fā)揮穩(wěn)定肥大細(xì)胞的作用，并且表現(xiàn)出比HCTP更優(yōu)越的抗過(guò)敏活性。

本研究利用RBL-2H3細(xì)胞初步揭示了FHCTP穩(wěn)定肥大細(xì)胞的體外機(jī)制，并結(jié)合小鼠被動(dòng)皮膚過(guò)敏模型明確了FHCTP可通過(guò)穩(wěn)定肥大細(xì)胞發(fā)揮抗過(guò)敏活性。刺麒麟菜多糖、紅邊茶多糖以及交鏈孢酚單甲醚（alternariol monomethyl ether，AME）均被證實(shí)能夠抑制RBL-2H3細(xì)胞脫顆粒并緩解小鼠被動(dòng)皮膚過(guò)敏反應(yīng)，并且與FHCTP作用途徑相似，雖然紅邊茶多糖對(duì)RBL-2H3細(xì)胞的作用機(jī)制并未完全解析，但刺麒麟菜多糖與AME同樣是通過(guò)抑制RBL-2H3細(xì)胞膜骨架蛋白的異構(gòu)與胞內(nèi)鈣離子濃度上升進(jìn)而抑制細(xì)胞脫顆粒，發(fā)揮抗過(guò)敏活性。不同的是，F(xiàn)HCTP亦對(duì)FcεRI的表達(dá)具有下調(diào)作用，這進(jìn)一步提高了其對(duì)細(xì)胞活化的抑制效果。然而，體外單一細(xì)胞模型與短期動(dòng)物實(shí)驗(yàn)無(wú)法完全準(zhǔn)確模擬并探究FHCTP的體內(nèi)免疫活性，F(xiàn)HCTP在體內(nèi)經(jīng)消化道降解、代謝后能否通過(guò)抑制FcεRI表達(dá)、肥大細(xì)胞脫顆粒發(fā)揮抗過(guò)敏作用，以及其體內(nèi)抗過(guò)敏活性與IgE分泌、Th2細(xì)胞活化和腸道菌群穩(wěn)態(tài)是否有聯(lián)系仍需構(gòu)建長(zhǎng)期的小鼠食物過(guò)敏模型進(jìn)一步探究。

結(jié)論

本研究利用植物乳植桿菌HM6008發(fā)酵魚腥草獲得FHCTP。理化性質(zhì)分析結(jié)果表明，發(fā)酵在不破壞多糖官能團(tuán)的情況下提高了多糖中甘露糖、葡萄糖醛酸和硫酸根的占比以及溶液的穩(wěn)定性，并且降低了多糖的粒徑和表觀黏度。體外肥大細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，F(xiàn)HCTP與HCTP可顯著抑制RBL-2H3細(xì)胞脫顆粒，其作用機(jī)制為抑制肥大細(xì)胞FcεRI表達(dá)以及細(xì)胞Ca2+內(nèi)流和細(xì)胞骨架F-actin的異構(gòu)，具有穩(wěn)定肥大細(xì)胞的作用；此外，小鼠被動(dòng)皮膚過(guò)敏反應(yīng)模型也表明兩種多糖在體內(nèi)均具有抗過(guò)敏活性，并且體外與體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果均證明FHCTP的抗過(guò)敏活性更佳。綜上所述，植物乳植桿菌HM6008發(fā)酵改善了HCTP的理化性質(zhì)并顯著提高其抗過(guò)敏活性，但FHCTP在體內(nèi)是否可通過(guò)抑制TH2細(xì)胞活化與調(diào)節(jié)腸道菌群等作用發(fā)揮抗過(guò)敏活性仍有待驗(yàn)證，本研究可為食藥物質(zhì)來(lái)源多糖的改性及其在抗過(guò)敏方面的開發(fā)提供參考。

引文格式：

林泳峰, 程珍, 劉文美, 等. 魚腥草多糖的發(fā)酵法制備與抗過(guò)敏活性[J]. 食品科學(xué), 2026, 47(2): 124-132. DOI:10.7506/spkx1002-6630-20250713-101.

LIN Yongfeng, CHENG Zhen, LIU Wenmei, et al. Fermentative preparation and antiallergic activity of Houttuynia cordata polysaccharides[J]. Food Science, 2026, 47(2): 124-132. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-20250713-101.

實(shí)習(xí)編輯：王雨婷；責(zé)任編輯：張睿梅。點(diǎn)擊下方閱讀原文即可查看全文。圖片來(lái)源于文章原文及攝圖網(wǎng)

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