人西尼羅病毒lgM抗體ELISA檢測試劑盒
編寫:深圳市恒昊生物科技有限公司
檢測原理
試劑盒采用間接法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被西尼羅病毒抗原的包被微孔中,依次加入標本、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中西尼羅病毒lgM抗體(WNV-lgM)的存在與否。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
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2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1.酶標儀(450nm)
2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒溫箱
操作注意事項
1.試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正常現象,水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。
2.實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3.預處理后的樣本請按照操作步驟用樣本稀釋液適當稀釋以達到試劑盒的的最佳檢測效果。
4.嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
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